科學(xué)家將拉曼效應(yīng)用于光熱顯微鏡
發(fā)布時間:2023-12-19 1842人看過
“我們開創(chuàng)了受激拉曼光熱成像[1]這個全新的方向,這是化學(xué)成像領(lǐng)域的一個新突破,這項技術(shù)未來一定會發(fā)展成為能夠被廣泛應(yīng)用的產(chǎn)品。”美國波士頓大學(xué)程繼新教授如是說。
在這次研究中,程繼新團隊利用一種新的物理機制,即受激拉曼本質(zhì)上是一個化學(xué)鍵振動吸收過程,吸收的能量變成熱形成焦點局部升溫,升溫改變焦點周圍樣品的折射率。由此,他們開發(fā)出受激拉曼光熱(Stimulated Raman Photothermal,SRP)顯微鏡。
該技術(shù)突破了此前受激拉曼散射(Stimulated Raman Scattering,SRS)成像的檢測極限,將調(diào)制深度提高了 500 倍,極高的調(diào)制深度為更高靈敏度的檢測奠定了基礎(chǔ)。
那么,與 SRS 相比,SRP 有哪些不同呢?具體來說,SRS 顯微鏡直接測量光被吸收后強度的變化,并提供光譜和空間信息;而 SRP 顯微鏡則是測量由樣品熱膨脹引起的光散射或由熱透鏡引起的折射,觀察樣品本身的溫度、折射率等變化,進而提供光譜和空間信息。
化學(xué)成像技術(shù)能夠“追蹤”細胞中的分子信息,但該領(lǐng)域最大的瓶頸之一是靈敏度。SRS 顯微鏡在揭示復(fù)雜系統(tǒng)中的分子結(jié)構(gòu)、動力學(xué)和耦合方面顯示出巨大的潛力。然而,由于其較小的調(diào)制深度和脈沖激光的散粒噪聲,SRS 的靈敏度難以突破毫摩爾級,這導(dǎo)致其無法對低濃度分子的觀察及對相關(guān)信息的追蹤。
此外,不可忽視的是,在使用 SRS 成像時,研究人員必須使用高倍物鏡來收集信號。如果想得到高分辨成像,就必須將兩個高倍物鏡擠在一起,這在操作上帶來極大的不便。而 SRP 的優(yōu)勢在于操作簡單、方便,只需要低倍物鏡就能夠測量相關(guān)信號,且檢測物鏡和樣品之間可以保持一定的距離。
由于 SRP 顯微鏡非常靈敏,可以通過它觀測不同的分子、不同的化學(xué)鍵,填補了該領(lǐng)域的數(shù)據(jù)空白。該技術(shù)有望應(yīng)用于環(huán)境科學(xué)、材料科學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域,例如環(huán)境中微塑料檢測、繪畫作品成份分析、病毒單顆粒譜學(xué)、單細胞和生物組織成像等。